MySQLで列の値を一意に保つにはどうすればよいですか？

S.Noを主キーのままにし、PCID + USERNAMEを一意にして、Hammeriteが言ったことに非常に近いものにします。

ALTER TABLE MyTable
    ADD PRIMARY KEY (`S.No`),
    ADD UNIQUE KEY `PCID_USER_uk` (`PCID`, `USERNAME`);